Pada tahun 1979, mantan detektif NYPD yang beralih profesi menjadi wiraniaga, Kyle Hyde, check in ke Hotel Dusk yang misterius. Tujuan utamanya adalah menemukan rekannya yang hilang dan mengungkap rahasia yang tersembunyi di balik masa lalu hotel.
Hotel Dusk: Room 215 memanfaatkan perangkat keras Nintendo DS secara unik dengan mengharuskan pemain memegang konsol secara vertikal, seperti buku. Permainan mengandalkan input stylus untuk menjelajahi lingkungan, memecahkan teka-teki logika, dan berinteraksi dengan objek.
Ceritanya menampilkan cabang dialog bercabang di mana pilihan yang salah dapat menyebabkan game over langsung. Pemain mengumpulkan barang dan mencatat petunjuk di buku catatan digital untuk memecahkan misteri yang tersebar di kamar-kamar hotel.
Animasi karakter rotoscope memberikan gaya visual yang khas. Hotel Dusk: Room 215 menonjol karena atmosfer noir dan fokus kuat pada investigasi berbasis narasi.