Pada tahun 1979, bekas detektif NYPD yang kini menjadi jurujual, Kyle Hyde, mendaftar masuk ke Hotel Dusk yang misteri. Matlamat utamanya adalah untuk mencari rakan kongsinya yang hilang dan membongkar rahsia yang tersembunyi di dalam sejarah hotel itu.
Hotel Dusk: Room 215 menggunakan perkakasan Nintendo DS secara unik dengan memerlukan pemain memegang sistem secara menegak, seperti buku. Permainan bergantung pada input stylus untuk meneroka persekitaran, menyelesaikan teka-teki logik, dan berinteraksi dengan objek.
Cerita ini menampilkan pokok dialog bercabang di mana pilihan yang salah boleh menyebabkan tamat permainan serta-merta. Pemain mengumpul item dan mencatat petunjuk dalam buku nota digital untuk menyelesaikan misteri yang tersebar di seluruh bilik hotel.
Animasi watak rotoskop memberikan permainan gaya visual yang tersendiri. Hotel Dusk: Room 215 menonjol kerana suasana noir dan tumpuan kuat pada penyiasatan berasaskan naratif.